课程名称

Microbiology & Immunology Experiments

所属学科

药学

教材名称

《微生物与免疫学》实验指导，房红莹、顾冠彬、徐培君、王蕾

授课年级

药学全英班

授课章节

模块一、免疫学实验

授课时间

300分钟

1. 教学目标：含知识目标、技能（能力）目标

1. 知识目标：

掌握特异性及非特异性免疫学反应原理、现象、反应条件及不同方法、目的。

2. 授课内容（依据教学大纲）及时间分配

1、非特异性免疫、抗原抗体反应（一）：

1）实验室安全和操作规则介绍（强调医疗垃圾和生活垃圾分开等）（10分钟）

2）示教：中性粒细胞和单核巨噬细胞吞噬作用，1套/室（讲解后自由观察）

3）示教：胶体金免疫渗析（孕检试剂，自拍视频），1套/室 （10分钟）

4）试管凝集试验（来了就做）：H菌液，O菌液，伤寒沙门菌免疫血清，生理盐水，1支/组（取4支试管）（120分钟）

5）乳胶凝集试验（包被有沙门菌抗体的乳胶颗粒+沙门菌），试剂盒50T，1套/室；每组做2个孔（空白对照、样本），示教：含空白对照、阳性对照、样本，1套/室，鼠伤寒沙门菌1支/组（10分钟）

6）玻片凝集试验：鼠伤寒沙门菌斜面培养物、抗鼠伤寒沙门菌抗血清、生理盐水，1支/组（10分钟）

2、非特异性免疫、抗原抗体反应（二）：

1）示教：单向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验、火箭电泳（30分钟）

2）对流免疫电泳（自做）：电泳板学生自浇，1片/2人。（120分钟）

3. 教学重点与难点

1. 教学重点

特异性免疫学反应原理

2. 教学难点

各类凝集试验的优劣及应用范围

4. 教学方法选择

1. 理论课堂教学

英文PPT讲解

2. 实验教学：

示教，现场示范和指导

5. 更新或补充内容提要

6. 复习思考题

什么叫凝集反应？直接凝集反应和间接凝集反应有何区别？血清学反应需哪些条件？

7. 学习资源、课外自主学习参考

(可以列出供学生进一步学习、拓展本章节内容的网站、著作、期刊的名称及内容等)

Microbiology & Immunology理论课本

课程名称

Microbiology & Immunology Experiments

所属学科

药学

教材名称

《微生物与免疫学》实验指导，房红莹、顾冠彬、徐培君、王蕾

授课年级

药学全英班

授课章节

模块二、细菌的基本特性

授课时间

600分钟

1. 教学目标：含知识目标、技能（能力）目标

1. 知识目标：

掌握细菌的基本特性。

2. 授课内容（依据教学大纲）及时间分配

1. 细菌的形态与结构检查法：

1）显微镜和油镜的使用原理及方法（30分钟）

2）革兰染色（自做）：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、生理盐水（1支/桌），载玻片（1片/人）、革兰染色液（5套/室）（60分钟）

3）示教：细菌涂片制作（20分钟）

 4）特殊结构（示教）：鞭毛（变形杆菌）、芽胞（枯草芽胞杆菌）、螺形菌（空肠弯曲菌）、荚膜（肺炎双球菌）（1-2套/室）（讲解后自由观察）（40分钟）

2、 细菌的培养法及代谢产物的检查：

 1）特殊培养基（示教）：血琼脂平板、SS平板、庖肉培养基（1套/室）（10分钟）

 2）细菌接种（自做）：金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌（1支/桌），肉汤、斜面、普通平板、半固体（1套/人）（30分钟）；播放录像：四种培养基接种的操作（20分钟）

 3）生化反应（示教）：糖发酵、硫化氢产生、尿素分解、吲哚试验、水溶性色素、脂溶性色素（1套/桌）（20分钟）

 4）生化反应（自做）：大肠埃希菌斜面、绿脓杆菌菌液（3支/室），甲型溶血性链球菌（3皿/室），金黄色葡萄球菌（用自己实验桌上的），氧化酶试剂、3%过氧化氢（1套/室）各类普通和特殊培养基，细菌接种方法，不同生化反应类型（40分钟）

3、细菌的分布、理化因素及生物因素对微生物的影响：

 1）咽喉、土壤、空气、手指的细菌检查（自做）：血平板（1块/桌），庖肉培养基（1支/桌），普通平板（2块/桌）（50分钟）

 2）紫外线杀菌（自做）：普通平板（1块/桌）（20分钟）

 3）药物敏感试验（自做）：普通平板（2块/桌），青霉素、链霉素、丁胺卡那霉素、庆大霉素（1套/桌）（25分钟）

 4）化学消毒剂（自做）：普通平板（2块/桌），新洁尔灭、碘酒、红汞、结晶紫（1套/桌）（25分钟）

 5）消毒仪器参观介绍：高压锅、煮沸消毒器、过滤除菌器、干热灭菌器（30分钟）

4、细菌毒素的检测：细菌内毒素的测定（鲎试验），铜绿假单胞菌外毒素测定（ELISA双抗体夹心法），免疫标记技术（150分钟）

 1）细菌内毒素的测定（鲎试验）（70分钟）

 2）铜绿假单胞菌外毒素测定（ELISA双抗体夹心法）：6孔/4人（含2个空白对照孔、1个标准孔、3个样品孔）；1套/室（5个稀释度的标准品、2个空白对照？）（60分钟）

3）观看免疫标记技术视频（20分钟）

3. 教学重点与难点

1. 教学重点

细菌的代谢特征及检测方法。

2. 教学难点

细菌代谢检测的各类方法的目的和意义。

4. 教学方法选择

1. 理论课堂教学

英文PPT讲解

2. 实验教学：

示教，现场示范和指导

5. 更新或补充内容提要

6. 复习思考题

 1、涂片后为什么必须进行固定？固定时应注意什么？

 2、要做好革兰染色，应注意哪些关键步骤？为什么？

 3、使用油镜时应注意哪些问题？

 4、按功能分，培养基分为哪几类，各有何用途？

 5、细菌的生化反应有何意义？

 6、如何检查灭菌后的培养基是无菌的？

 7、如果你需要配制一种含有某抗生素的基础培养基，其抗生素的终浓度为50 μg/mL，你将如何操作？

 8、什么是菌落？什么是菌苔？为什么分区划线接种法可用于细菌的

分离培养？

 9、在微生物学实验中，为什么要进行无菌操作？

 10、下列各物（体温计、平皿、皮肤、注射器、试管、普通琼脂培养基）宜采用何种方法进行消毒灭菌？

 11、某公司推出一种新型饮料，并声称是100%纯天然产品，不含防腐剂，利用你所掌握的微生物学知识，设计一个简单实验来初步判断此饮料是否含防腐剂。

 12、影响抑（杀）菌圈大小的因素有哪些？抑（杀）菌圈大小是否准确地反映出化学消毒剂抑（杀）菌能力的强弱？

13、什么是内毒素？外毒素？有哪些检测方法？

7. 学习资源、课外自主学习参考

(可以列出供学生进一步学习、拓展本章节内容的网站、著作、期刊的名称及内容等)

Microbiology & Immunology理论课本

课程名称

Microbiology & Immunology Experiments

所属学科

药学

教材名称

《微生物与免疫学》实验指导，房红莹、顾冠彬、徐培君、王蕾

授课年级

药学全英班

授课章节

模块三、药品中沙门菌的检查

授课时间

450分钟

1. 教学目标：含知识目标、技能（能力）目标

1. 知识目标：

掌握药品中致病菌沙门菌的检查流程和方法。

2. 授课内容（依据教学大纲）及时间分配

1、药品中沙门菌的检查（一）：

 1）链球菌、淋病奈瑟菌（示教）：2套/室（讲解后观察）（10分钟）

 2）葡萄球菌三种色素观察（示教）：1套/室（讲解后观察）（10分钟）

 3）甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌的溶血现象（示教）：1套/桌（讲解后观察）（10分钟）

 4）血浆凝固酶试验——试管法（自做）：无菌试管、金黄色葡萄球菌、血浆凝固酶、生理盐水（1支/桌）（40分钟）

 5）血浆凝固酶试验——玻片法（自做）：载玻片（1片/人），其余同上（40分钟）

 6）接种SS平板 ：1块/人（40分钟）

2、药品种沙门菌的检查（二）：

 1）长有粉色、黑色单菌落的SS平板，克氏双糖铁培养基（1支/人）（50分钟）

 3、药品中沙门菌的检查（三）：

 1）培养基接种：甘露醇、尿素、半固体、蛋白胨水（自做）1套/人（80分钟）

 2）镀银染色检查口腔中螺旋体（自做）：载玻片（1片/人），镀银染色液（5套/室）（70分钟）

4、药品中沙门菌的检查（四）：革兰染色、玻片凝集（100分钟）

3. 教学重点与难点

1. 教学重点

药品中沙门菌的检查流程和方法。

2. 教学难点

药品中沙门菌的检查的意义及流程。

4. 教学方法选择

1. 理论课堂教学

英文PPT讲解

2. 实验教学：

示教，现场示范和指导

5. 更新或补充内容提要

6. 复习思考题

 1、如何检验药品中是否存在金黄色葡萄球菌？

 2、结核杆菌为什么用抗酸染色?

3、如何检验药品中的大肠杆菌？请设计实验流程。

7. 学习资源、课外自主学习参考

(可以列出供学生进一步学习、拓展本章节内容的网站、著作、期刊的名称及内容等)

Microbiology & Immunology理论课本

课程名称

Microbiology & Immunology Experiments

所属学科

药学

教材名称

《微生物与免疫学》实验指导，房红莹、顾冠彬、徐培君、王蕾

授课年级

药学全英班

授课章节

模块四、其他细菌类别基本形态及检测

授课时间

200分钟

1. 教学目标：含知识目标、技能（能力）目标

1. 知识目标：

了解熟悉链霉菌、放射菌、真菌、螺旋体、淋球菌、念珠菌等各类细菌的基本形态特征和检测方法。

2. 授课内容（依据教学大纲）及时间分配

 1、示教：结核分枝杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、肉毒梭菌、支原体菌落、梅毒螺旋体，1套/室（30分钟）

 2、示教：放线菌、真菌厚膜孢子、大分生孢子、新生隐球菌  1套/室（30分钟）

 3、示教：三种真菌菌落观察   白假丝酵母菌、新生隐球菌、曲霉菌   1套/桌（30分钟）

4、白假丝酵母菌芽管形成试验  白假丝酵母菌、小牛血清 1支/桌（110分钟）

3. 教学重点与难点

1. 教学重点

各类细菌的形态区别。

2. 教学难点

各类细菌的不同外型特征。

4. 教学方法选择

1. 理论课堂教学

英文PPT讲解

2. 实验教学：

示教，现场示范和指导

5. 更新或补充内容提要

6. 复习思考题

 1、真菌小培养技术有何重要意义？

 2、哪些药品中不得检出白假丝酵母菌？为什么？

3、什么是支原体？衣原体？立克次体？螺旋体？

7. 学习资源、课外自主学习参考

(可以列出供学生进一步学习、拓展本章节内容的网站、著作、期刊的名称及内容等)

Microbiology & Immunology理论课本

课程名称

Microbiology & Immunology Experiments

所属学科

药学

教材名称

《微生物与免疫学》实验指导，房红莹、顾冠彬、徐培君、王蕾

授课年级

药学全英班

授课章节

模块五、细菌总数的检测

授课时间

100分钟

1. 教学目标：含知识目标、技能（能力）目标

1. 知识目标：

掌握细菌总数的测定方法。

2. 授课内容（依据教学大纲）及时间分配

1、细菌总数测定（自做） 稀释3个梯度/4人，具体方法按照预实验定

 1.2%软琼脂法/涂布法，玻璃棒 1包/桌 （60分钟）

2、细菌计数。（40分钟）

3. 教学重点与难点

1. 教学重点

细菌总数测定方法。

2. 教学难点

测定药品或食品中细菌总数的流程

4. 教学方法选择

1. 理论课堂教学

英文PPT讲解

2. 实验教学：

示教，现场示范和指导

5. 更新或补充内容提要

6. 复习思考题

1、细菌平板菌落计数法的影响因素有哪些？应如何避免？

7. 学习资源、课外自主学习参考

(可以列出供学生进一步学习、拓展本章节内容的网站、著作、期刊的名称及内容等)

Microbiology & Immunology理论课本

课程名称

Microbiology & Immunology Experiments

所属学科

药学

教材名称

《微生物与免疫学》实验指导，房红莹、顾冠彬、徐培君、王蕾

授课年级

药学全英班

授课章节

模块六、病毒学基本检测

授课时间

100分钟

1. 教学目标：含知识目标、技能（能力）目标

1. 知识目标：

了解病毒生物特性，掌握病毒的基本检测方法及原理。

2. 授课内容（依据教学大纲）及时间分配

 1、示教：正常细胞、病变细胞（CPE）、狂犬病毒内基小体，1套/室（10分钟）

 2、观看录像：鸡胚接种、病毒血凝试验（20分钟）

 3、病毒血凝试验（自做）: 1套/人（60分钟）

血凝板  1块/人，鸡血球  2支/桌，病毒液  1支/桌

4、观看录像：病毒的细胞培养（20分钟）

3. 教学重点与难点

1. 教学重点

病毒检测方法及原理。

2. 教学难点

病毒的培养技术。

4. 教学方法选择

1. 理论课堂教学

英文PPT讲解

2. 实验教学：

示教，现场示范和指导

5. 更新或补充内容提要

6. 复习思考题

1、病毒培养法有哪几种？目前采用的病毒快速诊断的技术有哪些？

7. 学习资源、课外自主学习参考

(可以列出供学生进一步学习、拓展本章节内容的网站、著作、期刊的名称及内容等)

Microbiology & Immunology理论课本